Pozlama Süresi Nedir ?

Pozlama süresi, film veya sensör üzerinde biriktirilen ve kaydedilen ışık miktarıdır. En iyi görüntüyü yakalayabilmek için doğru pozlama önemlidir, yüksek sinyaller için pozlama süresi düşürülür. Jel bantlarının kuvvetli UV ışık altında görüntülenmesinde bu süre birkaç saniyeyi geçmezken, western blot çalışmalarında düşük miktardaki proteinler zayıf sinyal verdiği için pozlama süresi bazen 10-20 dakikaya kadar arttırılır.

Eğer gereğinden yüksek bir pozlama süresi ile görüntü alırsanız, normal ve gerçek değerinden uzaklaşan çok parlak görüntüler alırsınız, bu sorunu önlemek için Gen-Box imagER Fx jel görüntüleme sistemlerinde saturasyon kontrolünü sağlayan bir fonksiyon bulunur, gerçek zamanlı görüntü üzerinde aşırı parlak bantları kırmızıya boyayarak sizi uyarır (bu kırmızılıklar alınan fotoğrafa işlenmez), bu sınıra geldiğinizde görüntü alma vakti gelmiş demektir.

İris (diyafram açıklığı), bantların parlaklığını etkileyen bir diğer fonksiyondur, yani sensöre ne kadar ışık ulaşacağını kontrol etmektir. Western blot çalışmalarında maksimum iris açık olması gerekirken, jel görüntülemede düşük iris/diyafram açıklığında daha uzun pozlama ile daha güzel görüntüler elde edersiniz.

 

Jel: İris kısıldıktan sonra 4 SANİYE pozlama süresi ile alınmış Agaroz Jel Görüntüsü (Boya: GelRed)

Jel: İris kısıldıktan sonra 4 SANİYE pozlama süresi ile alınmış Agaroz Jel Görüntüsü (Boya: GelRed)

 

Blot: İris tamamen AÇIK konumdayken 5 DAKİKA pozlama süresi ile alınmış Nitroselüloz Membran Görüntüsü (HRP: ECL)

Blot: İris tamamen AÇIK konumdayken 5 DAKİKA pozlama süresi ile alınmış Nitroselüloz Membran Görüntüsü (HRP: ECL)