Kamera sensörüne ışık fotonları ulaştığında elektriksel sinyale dönüştürülür, bu işlem kameranın sensörünün ısınmasına neden olur, ısınan sensör üzerinde sıcak piksel lekeleri (hot pixels) oluşmasına neden olur, bunlar ortalamadan daha yüksek karanlık akımına sahip sahte gürültü pikselleridir.

Sensörün soğutulması sayesinde, sensör içinde bu tür sıcak piksellerin oluşumunu önemli ölçüde en aza indirilir, bu istenmeyen lekeleri engellemek için kameranın sensörü çok düşük sıcaklıklara soğutulur, en etkin kullanılan popüler soğutma tipi peltier soğutma sistemidir, fan kullanılan bu sistemde yarı iletken malzeme kullanılır ve sensör sıcaklığı – 60 C’ye kadar düşürülebilir.

Western Blot görüntüleme çalışmalarında filtre ve boya kullanılmadığı, sadece numuneden yayılan ışık yakalandığı için sıcak piksel lekelerini sensörü soğutarak engellemek şarttır.

Isınan yüzeyden yayılan sıcak piksel lekelerinin peltier sensör soğutma sistemi ile engellenmesi.

GEN-BOX imagER CFx Sistemiyle alınmış blot görüntüsü (- 60 C Sensör Soğutma Kapasitesi)

Sensör teknolojisinde verimlilik faktörü olarak kullanılan quantum efficiency (QE) özetle birim zamanda sensör üzerine düşen fotonların, elektrona dönüştürülme oranı olarak tanımlanır.

Formüle edilmek istenirse Qe = e-/ph olarak tanımlanır. Burada;

ph : sensöre düşen toplan foton sayısı
e- : dönüştürülen toplam elektron sayısıdır.

Dolayısıyla, verimi yüksek bir sensörde en önemli unsur; sensör üzerine düşen fotonların olabildiğince fazlasını elektrona (akım) çevirebilmektir. Bu da, gelen fotonların, geriye yansıma olmaksızın, tamamını fotodiyot üzerine düşürebilmek ve fotodiyot üzerinden akıma çevirebilmek anlamına gelir.

Günümüzde yaygın olarak kullanılan sensörler Ön Yüzeyden Aydınlatma (Front Side Illumination) olarak bilinen sensörlerdir, bu sensörlerde yapı sırasıyla (ve özetle) Mikrolens – Renk Filtresi – Metal İletkenler – Fotodiyot şeklindedir.

GEN-BOX imagER CFx Kemilüminesnas Görüntüleme Sistemleri, yüksek kuantum verimine sahip soğutmalı bilimsel CCD kameralar kullanmaktadır.

Eğer gereğinden yüksek bir pozlama süresi ile görüntü alırsanız, normal ve gerçek değerinden uzaklaşan çok parlak görüntüler alırsınız, bu sorunu önlemek için Gen-Box imagER Fx jel görüntüleme sistemlerinde saturasyon kontrolünü sağlayan bir fonksiyon bulunur, gerçek zamanlı görüntü üzerinde aşırı parlak bantları kırmızıya boyayarak sizi uyarır (bu kırmızılıklar alınan fotoğrafa işlenmez), bu sınıra geldiğinizde görüntü alma vakti gelmiş demektir.

İris (diyafram açıklığı), bantların parlaklığını etkileyen bir diğer fonksiyondur, yani sensöre ne kadar ışık ulaşacağını kontrol etmektir. Western blot çalışmalarında maksimum iris açık olması gerekirken, jel görüntülemede düşük iris/diyafram açıklığında daha uzun pozlama ile daha güzel görüntüler elde edersiniz.

• Bu konu 5 yıl 7 ay önce önce ER Biyotek tarafından değiştirildi.
• Bu konu 5 yıl 7 ay önce önce ER Biyotek tarafından değiştirildi.
• Bu konu 5 yıl 7 ay önce önce ER Biyotek tarafından değiştirildi.

En güzel jel görüntülerini aşağıdaki adımları izleyerek alabilirsiniz;

Ön kontroller;

• Cihaz ve bilgisayarın güç kablolarını kontrol ediniz.
• Cihazdan çıkıp bilgisayara ulaşan 2 adet USB kablonun takılı olduğundan emin olunuz.
• Önce cihazın güç düğmesini açınız, sonra imagER Eyes görüntü yakalama programını çalıştırınız.

Yazılım kullanım adımları;

1. Yazılım giriş ekranından kullanıcı seçiniz. (Varsayılan kullanıcı olan ‘Misafir’ hesabını kullanabilir veya yeni bir isim ve şifre ile kendi hesabınızı oluşturabilirsiniz, cihaza hangi kullanıcı ile giriş yaparsanız alınan tüm görüntüler otomatik olarak o kullanıcıya ait klasöre arşivlenecektir)

2. Jel Görüntülemeyi seçiniz.

3. Cihazın kapısını açınız, Transilüminatörün üzerine jelinizi yerleştiriniz.

4. Kullandığınız boyayı seçiniz ve devam ediniz, ana ekranın açılmasını bekleyiniz.

Sistem otomatik olarak uygun ışık kaynaklarını ve emisyon filtresini seçerek jel görüntüsünü gerçek zamanlı olarak ekranda gösterecektir.

Jel görüntüsü almadan önce izlenecek adımlar;

5. FOKUS (netlik) ayarını daha hızlı yapabilmek için; POZLAMA Süresini azaltılır ve İRİS biraz açılır. (Pozlama süresini düşürmeniz kameranın ekranı yenilenme hızını arttıracağı için daha akıcı bir şekilde FOKUS ayarını yapmanızı sağlayacaktır)

Motorize sistemlerimizde FOKUS yazılım üzerindeki ayar tuşları ile (+) ve (-) butonları ile yapılır, ince ayarı kaçırmamak ve netlik değişimini görebilmeniz için birkaç tıklamadan sonra ön izleme ekranındaki değişimi izlemenizi tavsiye ederiz, ekrandaki görüntü en net halini aldığından fokus (odak) ayarınız tamamlanmış demektir. Bilgisayar kontrollü motorize zoom lenslere sahip sistemlerimizde jeli  ekrana yerleştirmek için zoom (+) ve (-) butonları, manuel sistemlerimizde lensin orta bölümündeki ayar çemberi kullanılır.

6. Fokus (Netlik) ayarı bittikten sonra POZLAMA süresi ayarına geçilir. Daha önce açılan (arttırılan) İRİS biraz kısılarak POZLAMA süresi arttırılır ve ideal görüntüye ulaşılır.

Jelinizin kalınlığına ve kullandığınız boyaya göre pozlama süresi değişecektir, ilk optimizasyonda bu üreyi 2 veya 3 saniyeye ayarlayıp İRİS’i kullanarak beklediğiniz görüntüye ulaşabilirsiniz, bu arada sol alt bölümdeki SATURASYON kontrolünü açınız, bu özellik normalin dışında bir parlaklık oluştuğunda bantları kırmızıya boyayarak sizi uyarır, sınıra yakın pozlama süresi kullanmanızı tavsiye ediyoruz.  

7. Ekrandaki görüntüyü kayıt altına almak için ekranın alt orta bölümde bulunan GÖRÜNTÜ AL küresine tıklanır ve görüntü alma işlemi başlatılır.

8. Elde edilen resim veya resimler seçilir ve KAYIT EDİLİR. (Program her ihtimale karşı alınan tüm görüntülerin otomatik yedeğini alır, bu sayede hiçbir veri kaybı olmaz)

9. Analiz programına aktarılarak ANALİZ EDİLİR.

Not: Blot görüntülemede TAMAMEN AÇIK İRİS ayarı ile, jel görüntülemede ise tam tersine KISIK İRİS ve arttırılmış pozlama süresi ile en ideal resimleri elde edebilirsiniz..

• Bu konu 5 yıl 8 ay önce önce ER Biyotek tarafından değiştirildi.
• Bu konu 5 yıl 8 ay önce önce ER Biyotek tarafından değiştirildi.
• Bu konu 5 yıl 8 ay önce önce ER Biyotek tarafından değiştirildi.

En güzel blot görüntülerini aşağıdaki adımları izleyerek alabilirsiniz;

Ön kontroller;

• Cihaz ve bilgisayarın güç kablolarını kontrol ediniz.
• Cihazdan çıkıp bilgisayara ulaşan 2 adet USB kablonun takılı olduğundan emin olunuz.
• Önce cihazın güç düğmesini açınız, sonra imagER Eyes görüntü yakalama programını çalıştırınız.

Yazılım kullanım adımları;

1. Yazılım giriş ekranından kullanıcı seçiniz. (Varsayılan kullanıcı olan ‘Misafir’ hesabını kullanabilir veya yeni bir isim ve şifre ile kendi hesabınızı oluşturabilirsiniz, cihaza hangi kullanıcı ile giriş yaparsanız alınan tüm görüntüler otomatik olarak o kullanıcıya ait klasöre arşivlenecektir. Tüm blot görüntüleri değerli olduğu için, koşulsuz olarak otomatik olarak bilgisayara kayıt edilir ve arşivlenir, isterseniz kendiniz silebilirsiniz)

2. Blot Görüntülemeyi seçiniz.

3. Kullandığınız boyayı seçiniz ve ana ekranın açılmasını bekleyiniz.

Ana ekran açıldığında görüntü almadan önce aşağıdaki kontrolleri yapınız;

• Kameranın önündeki zoom lensteki İRİS tamamen açık olmalı, yani kameraya gelen ışığın maksimum seviyede ulaşması sağlanmalıdır. (Motorize sistemlerimizde İRİS yazılım üzerinden (+) ile tamamen açık hale getirilir, manuel zoom lensli sistemlerimizde lensin ucuna en yakın olan ayar çemberi + yönde çevrilerek yapılır. İris’i tamamen açık konuma getirmeniz, kamera önündeki perdeyi tamamen açmanız anlamına gelir)
• FOKUS yani netlik ayarını yapınız (Kabin içine bir kartvizit veya yazılı bir kağıt parçası koyunuz ve cihazın kapısını aralık bırakınız, kapıyı açık bırakmak yazılımdan epi-beyaz ledleri açma butonunun kısa yoludur, sonra ön izlemeyi tetikleyiniz, yani ön izlemenin başlayabilmesi için pozlama süresini 100 milisaniyeye doğru arttırınız, ön izleme ekrana görüntü geldiğinde netlik ayarını yapınız.

Motorize sistemlerimizde FOKUS yazılım üzerindeki ayar tuşları ile (+) ve (-) butonları ile yapılır, ince ayarı kaçırmamak ve netlik değişimini görebilmeniz için birkaç tıklamadan sonra ön izleme ekranındaki değişimi izlemenizi tavsiye ederiz, ekrandaki görüntü en net halini aldığından fokus (odak) ayarınız tamamlanmış demektir. Bilgisayar kontrollü motorize zoom lenslere sahip sistemlerimizde membranı ekrana tam yerleştirmek için zoom (+) ve (-) butonları, manuel sistemlerimizde lensin orta bölümündeki ayar çemberi kullanılır.

Yazılım kullanımına devam edelim;

4. İris ve Fokus ayarı yapıldıktan sonra cihaza MEMBRAN YERLEŞTİRİLİR.

5. Cihazın KAPISI KAPATILIR.

6. Sol üst bölümdeki GÖRÜNTÜ SAYISI ve hemen altındaki POZLAMA SÜRESİ ayarlanır. (Örneğin: 1 tane 9 dakikalık tek bir görüntü alabileceğiniz gibi, 3 tane 3 dakikalık görüntü alarak alınan görünüler arasından seçim yapabilirsiniz)

7. Son olarak alt orta bölümde bulunan GÖRÜNTÜ AL küresine tıklanır ve görüntü alma işlemi başlatılır.

8. Elde edilen resim veya resimler seçilir ve KAYIT EDİLİR (Program her ihtimale karşı alınan tüm görüntülerin otomatik yedeğini alır, bu sayede hiçbir veri kaybı olmaz)

9. Analiz programına aktarılarak ANALİZ EDİLİR.

Pozlama süresi ile ilgili bilgi notu;

Pozlama süresi kameranın hangi süre boyunca toplayacağı ışık fotonlarının biriktirilip bir fotoğraf halinde kayıt edileceği anlamına gelir, blot çalışmalarında genelde 3-5 dakika yeterli olabildiği gibi çok az miktardaki proteinleri tespit edebilmek için 10 dakika veya daha uzun pozlama süreleri kullanılabilir, ekonomik fiyatlı etkinliği 2 saate ulaşabilen HRP ticari ürünler veya etkinliği 5-24 saate ulaşabilen uzun süre sinyal verebilen özel substratlar kullanılmaktadır, tercih edeceğiniz markanın önerdiği pozlama süresini kullanılarak görüntü alabilirsiniz, emin olmadığınız durumlarda 3 dakikalık 3 görüntü alabilirsiniz)

Not: Blot görüntülemede tamamen AÇIK İRİS ayarı ile, jel görüntülemede ise tam tersine KISIK İRİS ve arttırılmış pozlama süresi en güzel/ideal resimler elde edilir.

• Bu konu 5 yıl 8 ay önce önce ER Biyotek tarafından değiştirildi.
• Bu konu 5 yıl 8 ay önce önce ER Biyotek tarafından değiştirildi.
• Bu konu 5 yıl 8 ay önce önce ER Biyotek tarafından değiştirildi.
• Bu konu 5 yıl 8 ay önce önce ER Biyotek tarafından değiştirildi.
• Bu konu 5 yıl 8 ay önce önce ER Biyotek tarafından değiştirildi.
• Bu konu 5 yıl 8 ay önce önce ER Biyotek tarafından değiştirildi.
• Bu konu 5 yıl 8 ay önce önce ER Biyotek tarafından değiştirildi.
• Bu konu 5 yıl 8 ay önce önce ER Biyotek tarafından değiştirildi.
• Bu konu 5 yıl 8 ay önce önce ER Biyotek tarafından değiştirildi.
• Bu konu 5 yıl 8 ay önce önce ER Biyotek tarafından değiştirildi.
• Bu konu 5 yıl 8 ay önce önce ER Biyotek tarafından değiştirildi.