Western Blot Görüntüleme Nasıl Yapılır ?

Gen-Box imagER ile Blot Görüntüleme Nasıl Yapılır ?

En güzel blot görüntülerini aşağıdaki adımları izleyerek alabilirsiniz;

Ön kontroller;

• Cihaz ve bilgisayarın güç kablolarını kontrol ediniz.
• Cihazdan çıkıp bilgisayara ulaşan 2 adet USB kablonun takılı olduğundan emin olunuz.
• Önce cihazın güç düğmesini açınız, sonra imagER Eyes görüntü yakalama programını çalıştırınız.

Yazılım kullanım adımları;

1. Yazılım giriş ekranından kullanıcı seçiniz. (Varsayılan kullanıcı olan ‘Misafir’ hesabını kullanabilir veya yeni bir isim ve şifre ile kendi hesabınızı oluşturabilirsiniz, cihaza hangi kullanıcı ile giriş yaparsanız alınan tüm görüntüler otomatik olarak o kullanıcıya ait klasöre arşivlenecektir. Tüm blot görüntüleri değerli olduğu için, koşulsuz olarak otomatik olarak bilgisayara kayıt edilir ve arşivlenir, isterseniz kendiniz silebilirsiniz)

2. Blot Görüntülemeyi seçiniz.

3. Kullandığınız boyayı seçiniz ve ana ekranın açılmasını bekleyiniz.

Ana ekran açıldığında görüntü almadan önce aşağıdaki kontrolleri yapınız;

• Kameranın önündeki zoom lensteki İRİS tamamen açık olmalı, yani kameraya gelen ışığın maksimum seviyede ulaşması sağlanmalıdır. (Motorize sistemlerimizde İRİS yazılım üzerinden (+) ile tamamen açık hale getirilir, manuel zoom lensli sistemlerimizde lensin ucuna en yakın olan ayar çemberi + yönde çevrilerek yapılır. İris’i tamamen açık konuma getirmeniz, kamera önündeki perdeyi tamamen açmanız anlamına gelir)
• FOKUS yani netlik ayarını yapınız (Kabin içine bir kartvizit veya yazılı bir kağıt parçası koyunuz ve cihazın kapısını aralık bırakınız, kapıyı açık bırakmak yazılımdan epi-beyaz ledleri açma butonunun kısa yoludur, sonra ön izlemeyi tetikleyiniz, yani ön izlemenin başlayabilmesi için pozlama süresini 100 milisaniyeye doğru arttırınız, ön izleme ekrana görüntü geldiğinde netlik ayarını yapınız.

Motorize sistemlerimizde FOKUS yazılım üzerindeki ayar tuşları ile (+) ve (-) butonları ile yapılır, ince ayarı kaçırmamak ve netlik değişimini görebilmeniz için birkaç tıklamadan sonra ön izleme ekranındaki değişimi izlemenizi tavsiye ederiz, ekrandaki görüntü en net halini aldığından fokus (odak) ayarınız tamamlanmış demektir. Bilgisayar kontrollü motorize zoom lenslere sahip sistemlerimizde membranı ekrana tam yerleştirmek için zoom (+) ve (-) butonları, manuel sistemlerimizde lensin orta bölümündeki ayar çemberi kullanılır.

Yazılım kullanımına devam edelim;

4. İris ve Fokus ayarı yapıldıktan sonra cihaza MEMBRAN YERLEŞTİRİLİR.

5. Cihazın KAPISI KAPATILIR.

6. Sol üst bölümdeki GÖRÜNTÜ SAYISI ve hemen altındaki POZLAMA SÜRESİ ayarlanır. (Örneğin: 1 tane 9 dakikalık tek bir görüntü alabileceğiniz gibi, 3 tane 3 dakikalık görüntü alarak alınan görünüler arasından seçim yapabilirsiniz)

7. Son olarak alt orta bölümde bulunan GÖRÜNTÜ AL küresine tıklanır ve görüntü alma işlemi başlatılır.

8. Elde edilen resim veya resimler seçilir ve KAYIT EDİLİR (Program her ihtimale karşı alınan tüm görüntülerin otomatik yedeğini alır, bu sayede hiçbir veri kaybı olmaz)

9. Analiz programına aktarılarak ANALİZ EDİLİR.

 

Pozlama süresi ile ilgili bilgi notu;

Pozlama süresi kameranın hangi süre boyunca toplayacağı ışık fotonlarının biriktirilip bir fotoğraf halinde kayıt edileceği anlamına gelir, blot çalışmalarında genelde 3-5 dakika yeterli olabildiği gibi çok az miktardaki proteinleri tespit edebilmek için 10 dakika veya daha uzun pozlama süreleri kullanılabilir, ekonomik fiyatlı etkinliği 2 saate ulaşabilen HRP ticari ürünler veya etkinliği 5-24 saate ulaşabilen uzun süre sinyal verebilen özel substratlar kullanılmaktadır, tercih edeceğiniz markanın önerdiği pozlama süresini kullanılarak görüntü alabilirsiniz, emin olmadığınız durumlarda 3 dakikalık 3 görüntü alabilirsiniz)

Not: Blot görüntülemede tamamen AÇIK İRİS ayarı ile, jel görüntülemede ise tam tersine KISIK İRİS ve arttırılmış pozlama süresi en güzel/ideal resimler elde edilir.

• This topic was modified 5 years, 3 months ago by ER Biyotek.
• This topic was modified 5 years, 3 months ago by ER Biyotek.
• This topic was modified 5 years, 3 months ago by ER Biyotek.
• This topic was modified 5 years, 3 months ago by ER Biyotek.
• This topic was modified 5 years, 3 months ago by ER Biyotek.
• This topic was modified 5 years, 3 months ago by ER Biyotek.
• This topic was modified 5 years, 3 months ago by ER Biyotek.
• This topic was modified 5 years, 3 months ago by ER Biyotek.
• This topic was modified 5 years, 3 months ago by ER Biyotek.
• This topic was modified 5 years, 3 months ago by ER Biyotek.
• This topic was modified 5 years, 3 months ago by ER Biyotek.